Testul ELISA este un examen medical de laborator, în timpul căruia are loc o așa-numită reacție antigen-anticorp. Pot fi testate diferite antigene care joacă un rol în medicina umană sau veterinară. Doar institutele de laborator acreditate sunt însărcinate să efectueze testul în Germania.
Ce este procedura?
În cadrul examinărilor medicale de laborator, testul ELISA aparține așa-numitelor proceduri imunologice. Prin procedura de testare, proteine molecule pot fi detectate în diferite fluide ale corpului. ELISA este abrevierea pentru testul imuno-absorbant legat enzimatic. Prin urmare, este o denumire în limba engleză care, totuși, s-a stabilit în utilizarea medicală germană. Testul ELISA aparține așa-numitelor proceduri imunologice din cadrul examenelor medicale de laborator. Procedura de testare poate fi utilizată pentru detectarea proteinelor molecule într-o mare varietate de fluide ale corpului. Detectarea acestora molecule la rândul lor, se pot trage concluzii cu privire la anumite boli sau imagini clinice, motiv pentru care medicii își fac și ei diagnosticul dependent de rezultatul unui astfel de test ELISA. Prin urmare, procedura de testare are o mare importanță în practica clinică de zi cu zi, fie în ambulatoriu, fie în regim de internare. Corespondența fluide ale corpului, de exemplu întreg sânge sau fluide din articulații, sunt trimise la laborator imediat după ce au fost colectate de la pacient. Acestea sunt de obicei mostre destul de urgente, deoarece materialul nativ este considerat sensibil și ar trebui examinat cât mai repede posibil. Așa-numitele probe supraevaluate pot conduce la rezultate false negative deoarece patologic proteine între timp au fost reduse sau complet degradate. Astfel, așa-numitele preanalitice joacă un rol important în ELISA; rezultatele suspecte sau negative trebuie repetate din nou dacă sunt prezente simptome clinice adecvate.
Funcția, efectul și obiectivele
Pentru efectuarea corectă a testelor într-un laborator medical acreditat, sunt absolut necesare eprubete și așa-numitele plăci de microtitrare. Aceste plăci cu indentări semiconcave fine sunt fabricate din plastic special și sunt acoperite fiecare cu un anticorp foarte specific. Dacă antigenul care urmează să fie detectat este prezent într-un fluid corporal care urmează să fie examinat, atunci are loc o reacție specifică antigen-anticorp conform așa-numitului principiu blocare. Materialul de probă poate fi introdus în plăci fie manual de către personalul de laborator folosind pipete, fie complet automat. În institutele medicale moderne de laborator, pentru diagnosticarea ELISA sunt utilizate numai sisteme complet automatizate. Cu toate acestea, acestea trebuie monitorizate de personal instruit, asistenți de laborator medical-tehnici. Așa-numitul control al calității intern și extern este, de asemenea, responsabilitatea personalului de laborator, superior personalului medical pentru medicina de laborator, boală infecțioasă epidemiologie și microbiologie. După primul lot de testare, adică după ce materialul a fost pipetat pe plăci, antigenii specifici din probă, dacă sunt prezenți, s-au legat deja de anticorpi pe placa de plastic. O spălare cu soluție salină fiziologică este apoi efectuată pentru a elimina factorii care interferează, cum ar fi antigenele nedorite sau proteine din preparat. Acest pas este foarte important pentru a evita reacțiile fals pozitive. Un rezultat fals pozitiv interpretat de laborator poate avea consecințe fatale pentru un pacient. În a doua etapă a testului, se adaugă un alt anticorp care este cuplat la o enzimă. Acest anticorp marcat se leagă de asemenea de antigen. Într-o a treia și ultima etapă, se adaugă un colorant special într-o cantitate definită, care este degradată într-o măsură mai mare sau mai mică de resturile de enzime care sunt încă prezente. Doar o astfel de enzimă poate fi degradată, care nu a fost legată anterior de antigen împreună cu anticorpul. Enzima liberă este capabilă să scindeze colorantul adăugat. Cantitatea exactă de colorant despicat poate fi determinată cu precizie cu o altă metodă de laborator, așa-numita fotometrie. Acest lucru permite să se tragă concluzii precise dacă antigenul este prezent într-un eșantion de material și, în caz afirmativ, cât de mult. dar și pentru a le monitoriza progresul. Dacă antigenul concentrare în test devine mai mic în cursul terapie, terapia este considerată de succes.
Riscuri, efecte secundare și pericole
Testul ELISA își obține valoarea informativă în primul rând prin detectarea structurilor antigenice din fluidele corporale. Testul permite o așa-numită afirmație calitativă, dar și semicantitativă și cantitativă despre prezența suspectată a anumitor antigeni în fluidele corporale. Întreg sânge nu poate fi utilizat pentru test, doar ser de sânge. Un test direct pe pacient, de exemplu de la capilar sânge a vârf degetului, nu este, așadar, ca și în cazul altor teste serologice, până în prezent. În medicina umană, testul ELISA este utilizat în primul rând pentru detectarea antigenelor în infecțiile bacteriene, virale sau fungice. În plus, toate rezultatele pozitive ale hepatită serologia este verificată din nou cu un test ELISA ca standard. Anumit hormoni, de exemplu sarcină hormonul HCG, poate fi determinat și cu testul ELISA. Dacă apar anumite complicații în timpul sarcină, cunoașterea precisă a concentrare a hormonului sarcinii din sânge este foarte util diagnostic și terapeutic. O altă indicație pentru test este detectarea așa-numitelor paraproteine în urină, deoarece acestea apar, de exemplu, în diferite boli tumorale, cum ar fi mielomul multiplu. Testul ELISA este încă efectuat în multe laboratoare astăzi, dar este considerat învechit de experți. Reacția imună cuplată la enzime în testul ELISA a fost înlocuit din ce în ce mai mult în ultimii ani cu etichete radioactive anticorpi, care oferă un rezultat de măsurare cantitativ și mai bun. Aceste teste se mai numesc RIA, Radio Immunabsorbent Assay. Alte progrese specifice ale ELISA sunt metodele chimice ușoare, cum ar fi luminescența sau fluorescența.
