Analiza secțiunii înghețate
Acest lucru este necesar dacă chirurgul are nevoie de informații despre țesutul îndepărtat în timpul unei operații, pentru a decide cu privire la cursul procedurii. De exemplu, o tumoare malignă mică este eliminată din rinichi. Acum este necesară o incizie rapidă pentru a vedea dacă tumora a fost complet îndepărtată sau dacă există încă cantități masive de țesut malign la marginile probelor de țesut.
În cele din urmă, rezultatul examinării secțiunii înghețate determină cursul operației și planul de terapie ulterioară al pacientului. Cum funcționează o examinare a secțiunii înghețate? În decurs de 10 minute țesutul este stabilizat prin îngheț la -20 ° C, apoi se face o incizie groasă de 5-10 μm pe așa-numitul microtom. Acesta este așezat pe un tobogan, o placă mică de sticlă și colorat rapid. La sfârșit, constatările sunt examinate la microscop și rezultatul poate fi transmis imediat la sala de operație.
Metode de colorare
Multe metode de colorare histologică s-au dezvoltat în ultimii 120 de ani. Structurile celulare și țesuturile sunt împărțite în celule bazofile, acidofile și neutrofile pe baza reacției de culoare cu agenții de colorare. Mai mult, există și structuri agirofile și nucleofile.
Basofilul colorează tot ceea ce conține o grupă acidă și este colorat cu un colorant bazic (de exemplu, hematoxilină sau albastru de metilen). Structurile acidofile sunt bazice și, prin urmare, pot fi colorate cu eroziune sau cu fucsină acidă (coloranți acizi). Acestea includ citoplasma și colagen fibre.
Componentele neutrofile sau lipofile nu pot reacționa fie cu un colorant acid, fie cu un colorant bazic și, prin urmare, nu pot fi colorate. Componentele agirofile pot lega ionii de argint și le pot transforma în argint elementar. O reacție de culoare nucleofilă (nucleu = nucleu celular, iubitoare de nucleu celular) rezultă din coloranții nucleofili din nucleul celular.Acestea sunt legarea ADN-ului sau substanțe bazice care se leagă de acizii nucleici.
Astăzi, metodele de colorare bine încercate au fost completate cu metode imunologice. Reacția antigen-anticorp este utilizată în această tehnică pentru a detecta anumite proprietăți celulare. Reacția poate fi apoi vizibilă printr-o tehnică sofisticată.
Metodele de colorare utilizate frecvent sunt: colorarea HE = colorarea hematoxilină-eozină: hematoxilina, un colorant natural, colorează toate structurile în albastru, care sunt bazofile (= iubitoare de baze) și, prin urmare, acide, cum ar fi ADN-ul, nucleele celulare, ribozomietc. Eozina, pe de altă parte, este produsă sintetic. Eozina colorează toate structurile celulare în roșu dacă sunt acidofile (= iubitoare de acid) sau bazice.
proteine a citoplasmei, mitocondriile, și colagen sunt printre ei. Colorare Azan: Este compusă din primele litere de ambele culori, azocarmină G și anilină albastru-auriu portocaliu: Această pată nucleul celular iar fibrele musculare roșii și citoplasma roșiatică. colagenul iar fibrele reticulare devin albastre în această colorare.
Pata Giemsa (Giemsa's Azure-Eosin-Methylene Blue) este folosită pentru a pata sânge frotiuri celulare. Nucleii celulari pot fi ușor recunoscuți prin reacția de culoare violet. Citoplasma se colorează albăstrui.
În colorarea elastică (resorcinol-fucsin-orceină), toate fibrele elastice sunt prezentate în negru-violet. Metoda de colorare van Gieson se caracterizează prin faptul că colorarea se realizează mai întâi cu hematoxilină. Apoi se folosește fuchsina acidului picric (micro fuchsin) sau tiazina acidului picric.
În cele din urmă, nucleele celulare apar maro negru-închis, citoplasma apare mai degrabă maro deschis. Contrastarea cu acid picric tiazină pete fibrele elastice și țesutul muscular galben-portocaliu și fibrele de colagen roșu. În colorarea cu tricrom conform lui Masson-Goldner, dimensiunea moleculei de colorant este cel mai important factor în metoda de colorare.
Se folosește hematoxilina de fier, de obicei cu trei coloranți suplimentari, și anume vulpea acidă, portocaliul G și verde deschis. Pata colagenos țesut conjunctiv iar mucusul verde, nucleii celulelor albastru-negru, citoplasma roșie, mușchii roșu pal și roșu sânge celule (eritrocite) portocaliu rosu. În plus, există o colorare Gram, care servește la diferențiere bacterii.
Gram-pozitive bacterii sunt colorate în albastru și bacteriile Gram negative sunt colorate în roșu. Colorația Ziehl-Neelsen este de asemenea utilizată pentru bacterii, și anume cele care sunt rezistente la acid și, de exemplu, arată tuberculoză agenți patogeni în roșu. Alte metode de colorare care ar trebui menționate aici sunt reacția Berlin-Blue, care este responsabilă cu detectarea ionilor de fier trivalenți în secțiuni de țesut și metoda de colorare a hematoxilinei de fier conform Heidenhain.
