Diagnosticul de pre-fertilizare oferă posibilitatea testării genetice a femeii ouă ca parte din fertilizare in vitro (FIV). Testele sunt efectuate pe cromozomi din primul și al doilea corp polar, care se formează în timpul diviziei 1 și 2 de maturare după introducerea unui mascul spermă în ou. Metoda are avantajul că nu este diagnostic de preimplantare de iure (PGD), deoarece examinarea se efectuează înainte de fuziunea nucleilor feminini și masculini, astfel încât diagnosticul genetic de prefertilizare este permis în unele țări cu interdicții PGD.
Ce este diagnosticul de fertilizare?
Diagnosticul de pre-fertilizare oferă posibilitatea testării genetice a femeii ouă in contextul fertilizare in vitro. Diagnosticul de pre-fertilizare creează posibilitatea de a detecta aberații cromozomiale pe genomul haploid al ovocitului feminin în contextul fertilizare in vitro (FIV). În special, abaterile numerice ale anumitor cromozomi (aneuploidie) și anomalii ale anumitor gene care cauzează boli ereditare pot fi detectate. Când un bărbat spermă este introdus în citoplasma celulei ou în timpul FIV, aceasta inițiază prima și a doua diviziune de maturare (meioză I și II) în celula de ou. În fiecare caz, două celule „de prisos”, corpurile polare, care au același set de cromozomi ca ovocit în sine, sunt produse ca urmare a divizării. Corpurile polare, care în mod normal ar fi descompuse de corp, sunt îndepărtate de corpul polar biopsie pentru analiza cromozomilor. Deoarece diagnosticul de prefertilitate este întotdeauna efectuat pe corpurile polare, procedura se mai numește și diagnostic de corp polar (PCD). Avantajul metodei de examinare este că poate fi efectuat chiar și în unele țări în care diagnosticul genetic pre-implantare (PGD) este interzis, deoarece examinarea se efectuează pe genomul celulei ovule atunci când nucleele din spermă celula și celula de ou nu s-au contopit încă. Dezavantajul este că numai aberațiile cromozomiale ale genomului matern pot fi examinate. Cromozomii spermei introduși în citoplasma celulei de ou nu pot fi detectați prin această metodă. Bolile legate de Y nu pot fi detectate deoarece setul de cromozomi haploizi ai ovocitului nu poate conține un cromozom Y.
Funcția, efectul și obiectivele
Diagnosticul de prefertilizare sub formă de testare genetică a corpului polar poate detecta anomalii numerice (aneuploidie) în anumiți cromozomi ai genomului matern, precum și translocații prin care segmentele de cromozomi au fost separate și reintroduse în locația greșită. În plus, X-linked genă pot fi diagnosticate mutații care sunt moștenite matern și se bazează pe mutația unei singure gene (boală monogenetică). Acest lucru necesită cunoașterea potențialei boli moștenite pentru a viza o anumită genă pe cromozomul X. În cazul moștenirii recesive, există șansa ca cromozomul X al corpului polar - și astfel și cromozomul X al ovulului fertilizat - să conțină alela sănătoasă a corespunzătorului. genă. Procedura în sine implică un corp polar biopsie, în care cele două corpuri polare haploide sunt îndepărtate din ou și cromozomii sunt apoi supuși FISH (hibridizarea in situ a fluorescenței) testarea. biopsie a corpurilor polare reprezintă o provocare enormă pentru laboratorul care efectuează testul, deoarece identificarea și izolarea corpurilor polare necesită o anumită experiență. Pentru procedura de testare FISH, așa-numitele sonde ADN sunt disponibile pentru cromozomii selectați, care se combină cu cromozomii haploizi corespunzători deoarece au secvența complementară de aminoacizi. Sondele ADN sunt marcate cu diferite culori fluorescente, astfel încât cromozomii să poată fi identificați ulterior cu ajutorul unui software special și numărați într-o procedură automată. Majoritatea aberațiilor cromozomiale, cum ar fi aneuploidiile și deplasările cromozomiale în interiorul unui cromozom, sunt letale. Aceasta înseamnă că fie nu se formează zigot în timpul FIV, fie embrion este respins după transplantare în uter, sau este devreme sau târziu avort. Deoarece frecvența aberațiilor cromozomiale la femei ouă crește odată cu vârsta, un obiectiv important al diagnosticului de fertilitate este o selecție pozitivă a ovulelor fertilizate. Doar ouăle fertilizate cu - în măsura în care se recunosc - genom intact sunt re-transplantate în uter. Selecția pozitivă este menită să mărească sarcină rata după FIV și reduce rata ovulelor fertilizate respinse și numărul avorturilor spontane. Un alt obiectiv este de a exclude bolile ereditare bazate pe aberații cromozomiale sau anumite defecte genetice ale ovulului fertilizat re-transplantat de la început prin selecția pozitivă a ovulelor fertilizate. Bolile moștenite tipice care pot fi excluse prin test includ fibroză chistică, atrofie musculară spinală, și celulă seceră anemie.
Riscuri, efecte secundare și pericole
Diagnosticul de pre-fertilizare se efectuează în afara corpului și, prin urmare, nu prezintă riscuri fizice suplimentare pentru femeia implicată. Riscurile fizice minore de rănire și infecție sunt asociate numai cu recuperarea ouălor. Spre deosebire de PGD, care implică și examinarea cromozomială prin testul FISH, în diagnosticul de fertilitate numai materialul cromozomial și genetic de la mamă poate fi examinat. Aceasta înseamnă că dacă testul FISH este negativ și nu sunt diagnosticate aberații cromozomiale sau genetice, părinții pot avea așteptări excesiv de pozitive cu privire la evoluția sarcină și nașterea ulterioară. Aberațiile cromozomiale ale genomului patern și, eventual, anomaliile existente ale cromozomului Y, care pot provoca o boală ereditară legată de sex, nu sunt înregistrate. În acest sens, diagnosticarea prefertilizării este chiar mai incompletă decât PGD, în care întregul genom al embrion poate fi examinat în stadiul de blastulă. Cu toate acestea, chiar și în cazul unui PGD negativ, nu poate fi exclus faptul că defectele genetice sunt prezente în genomul embrion, care poate provoca mal dezvoltare și posibil conduce la deficiențe după naștere. Testul FISH se poate referi doar la cromozomi și gene selectate.
